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雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒100管/96樣
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雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒100管/96樣公司正在出售的產(chǎn)品:15.6-1000 pg/mL 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 15.6-1000 pg/mL 番茄特定基因序列PG)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha,
  雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒100管/96樣的詳細(xì)資料:

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒100管/96樣

規(guī)格

100管/96樣

檢測(cè)方法

微量法

貨號(hào)

BJ-01S10150

11.png 

 

 

商品介紹:

測(cè)定意義:

強(qiáng)堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物;紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān),故可用來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。該方法測(cè)定范圍為1~10mg蛋白質(zhì),適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品,尤其是動(dòng)物材料。

試劑組成和配置

1、雙縮脲試劑×1瓶,4℃保存;

2、10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白×1支,-20℃保存;

3、標(biāo)準(zhǔn)蛋白配制:取10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白100μl加雙蒸水100μl,即得5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

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北方雜交*試劑盒  

動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原1Ealdo-keto reductase 1E)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20

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石蠟切片組織PAR-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  10/20

基因組DNA體外*甲基化(sss1)處理試劑盒  5

總脂肪(lipase)定量檢測(cè)試劑盒  50

細(xì)胞APC蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒  10/50

5-HTP高效液相色譜電化學(xué)定量檢測(cè)試劑盒  20

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 雙縮脲法蛋白含量 測(cè)試盒 100管/96樣
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