產品參數: 中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 產品貨號 | PARP1和PARP2抑制劑 | MK-4827 tosylate | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | BJ-01X7344 |
商品詳細介紹: MK-4827tosylate是一種有效的PARP1和PARP2抑制劑,IC50值分別為3.8nM和2.1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! :1038915-73-9 別名:Niraparib tosylate 純度:98.88% 分子量:492.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 Pericarpium citri reticulatae陳皮染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DNA Polymerase beta DNA聚合β抗體 規(guī)格: 0.2mlDCK 脫氧胞苷激抗體 規(guī)格: 0.2ml Taylorella equigenitalis馬生殖泰勒氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-PDGFRA(Tyr754) 磷酸化小板源性生因子受體-α抗體 規(guī)格: 0.1mlGLUR 肽還原抗體 規(guī)格: 0.1ml Mannheimia ruminalis反芻獸曼氏桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1361) 磷酸化胰島素受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結節(jié)疹病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-3天phgophs-ATG4C(Ser177) 磷酸化自噬相關蛋白4C抗體 規(guī)格: 0.1ml 甲型流感()H1N1/H3亞型雙重RT-PCR試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周AMSH 信號轉導銜接結合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Poliovirus(PV)脊髓灰質炎病毒通用型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HHV8/ORF50 人類皰疹毒8抗體 規(guī)格: 0.2ml 貓源性成分PCR檢測試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-KCND2/Kv4.2(Thr607) 磷酸化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 規(guī)格: 0.1ml Radix isatidis染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Smad1 細胞信號轉導分子Smad-1抗體 規(guī)格: 0.1ml Salmonella hadar哈達爾沙門氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-RhoA(Ser188) 磷酸化RhoA蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Microsporum canis 犬小孢子探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周LIMS1 整合素和生因子樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml PARP1和PARP2抑制劑P糖蛋白抑制劑(Tariquidar) HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781) JAK2抑制劑(CHZ868) PDE8抑制劑(PF-04957325) mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027) VEGFR/PDGFR/FGFR抑制劑 人I型PRMTs抑制劑(MS023) PRMT5抑制劑(GSK3326595) FGFR4抑制劑(BLU-554) BTK抑制劑(ONO-4059) PAK1抑制劑(G-5555)
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