特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。 產(chǎn)品名稱 | ATP含量測(cè)試盒50管/24樣 | 規(guī)格 | 50管/24樣 | 檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 | 貨號(hào) | BJ-01S9738 |
商品介紹: 測(cè)定意義: ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。 測(cè)定原理: 肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測(cè)磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。 自備儀器和用品: 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。 |
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 Bordetella bronchiseptica支氣管敗血波氏桿探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒A型探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Bacillus amyloliquefaciens解淀粉芽孢桿PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 1-3天 Equine Coronavirus(ECoV)馬探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Coxsakie Virus(CV)柯薩奇病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Retinervus luffae fructus絲瓜絡(luò)PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 Radopholus similis香蕉穿孔線蟲(chóng)PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 鵪鶉源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Group B Streptococcus (GBS)B組鏈球PCR試劑盒 定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Bovine Rhinitis Virus (BRV)牛鼻炎病毒通用 探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周 Folium perillae紫蘇葉探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 Herba eupatorii佩蘭探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周 ATP含量測(cè)試盒50管/24樣載玻片細(xì)胞CASPASE-9蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次 Androgen Receptor(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 100微克 載玻片細(xì)胞CYTOCHROME C蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次 乳糖(腦膜炎奈瑟氏菌專用) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20ml/支 6.5%NaCl葡萄糖瓊脂 英文名稱:6.5% NaCl Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 組織RSE激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次 石蠟切片羅丹寧(RHODANINE)銅染色試劑盒 50次 1%NaCl阿拉伯糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 細(xì)胞TNF BETA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次 植物氧化型甘肽(GSSG)濃度高效液相色譜定量檢測(cè)試劑盒 50次 細(xì)胞半胱蛋白-13(CASPASE-13)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
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