中文名稱：Rhodamine 123染色試劑盒 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：100T 產(chǎn)品貨號：BJ-01X6491 Rhodamine 123染色液可用于細胞凋亡檢測，Rhodamine 123是一種細胞通透性的、陽離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒有細胞毒性，Rhodamine 123由于帶陽離子所以當線粒體膜電位存在的時候就會透過細胞膜在活細胞的線粒體內(nèi)聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當膜電位下降的時候，聚集的Rhodamine 123就減少，從而發(fā)光強度降低。Rhodamine 123常與Cy5和AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等組合進行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細胞凋亡時,可用Rhodamine 123 來檢測線粒體的膜電位,而用NAO來檢測線粒體結(jié)構(gòu)的完整性。Rhodamine 123，可用于對許多種細胞進行染色，包括植物細胞和細菌。由于細胞內(nèi)ATP的量與Rhodamine 123的熒光強度之間有相關(guān)性，Rhodamine 123也可應(yīng)用于檢測細胞內(nèi)的ATP。 儲存條件：2-8℃避光保存。 長期保存-20℃避光保存。 有效期：六個月。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程： 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備： 1） 準備F-12K培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。 二． 細胞處理： 1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)方法： 1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次； ②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化； ③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止； ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清； ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基； ⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細胞復(fù)蘇： ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。 3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶） ②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化； ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞； ④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。 Jaagsiekte Sheep Retrovirus(JSRV)羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Influenza Virus A甲型流感（）病毒H1N1亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 蝦源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Pseudomonas mallei鼻疽假單胞LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結(jié)節(jié)疹病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周 Herba schizonepetae荊芥探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周 Enterovirus(EV)腸道病毒C組探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Carp Edema Virus,CEV 鯉浮腫病毒LAMP試劑盒 定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周 Ehrlichia risticii里氏埃里希氏體探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Ippy Virus(IPPYV)伊派病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)真鯛虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Echinococcus granulosus細粒棘球絳蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Rhodamine 123染色試劑盒人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 變形桿菌成套生化鑒定管（SN） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：13種/盒*10 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒*直銷 豬白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒*直銷 牛雄烯二酮(ASD)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)免疫試劑盒進口、分裝 雞活化素A(ACV-A)免疫試劑盒*直銷 小鼠Toll樣受體5(TLR-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 大鼠細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 兔前列腺素F(PG-F)免疫試劑盒進口、分裝 大鼠胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒*直銷 操作規(guī)程 1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時. 2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。 3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。 4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。 6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。 7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。 8、結(jié)果分析 a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90) |
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