培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 本公司代理ATCC細胞,提供售前售后一條龍服務,若要獲取詳細的說明書或價格信息,請咨詢在線客服。 產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | HIC(人小腸癌細胞)規(guī)格 | HIC (human small intestine cancer cell) | 5×106cells |
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 ? 細胞培養(yǎng)技巧: 一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 % 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。 凍存的步驟: 1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀察細胞生長情形。 2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。 3. 依細胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1 ml) 計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。 4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻, 分裝于已標示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。 5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。 6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設定程序之等速降溫機中,再放入液氮槽中。程序為: program 7: HB CELL 。 實驗報告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 雙(4-基)胺(>98.0%(GC)) 質量規(guī)格:>98.0%(GC) Bis(4-iodophenyl)amine 人肝實質細胞*培養(yǎng)基暫無 Eupenicillium euglaucum 1-氧-酰旋覆花內酯 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg CD33抗體 ALT/GPT ELISA Kit 丙氨轉氨酶/谷丙轉氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒 朝藿定A1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒,英文名:MMP-9 ELISA Kit 芫花素;Genkwanin 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體 CENTα1 ELISA Kit 矢苷α1(CENTα1)ELISA試劑盒 肼(標準品) 質量規(guī)格:供檢查用 Hydrazine sulfate 銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosaU251(人膠質瘤細胞) 洛美沙星天冬氨鹽 質量規(guī)格:美國進口 Lomefloxacin, Aspartate MCF-7(人腺細胞)5×106cells/瓶×2 鹽卡替洛爾(標準品) 質量規(guī)格:鑒別 2(1H)-QUINOLINONE 毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae 雙素;Dihydroartemis 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 人肌3,4,5三酯依賴的消旋交換因子1(P-Rex1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠雌激素轉移酶(SULT1E1)ELISA試劑盒,英文名:SULT1E1 ELISA Kit 異補骨脂查爾;補骨脂素 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Isobavachalcone SGC-7901, 人胃腺細胞系Lec1(倉鼠卵巢細胞) 小葉榕 英文名稱:Ficus microcarpa 保存:-20℃ 規(guī)格:20g NIPAL2蛋白抗體 姜(標準品) 質量規(guī)格:GC≥98%,進口分裝 Zingerone 黑曲霉 Aspergillus niger臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus 甘草;甘草甜素;甘草皂苷 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 6號染色體開放閱讀框70抗體 PTX3 ELISA Kit 正五聚蛋白3(PTX3)ELISA試劑盒 野菊花內酯 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg ELISA Kit for Human High mobility group protein HMG-I/HMG-Y小鼠泛醌細胞色素C還原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA試劑盒,英文名:UQCRC2 ELISA Kit HIC(人小腸癌細胞)規(guī)格Mouse Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml EpCAM/CD326 上皮細胞粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml Phospho-Cas (Tyr165) 磷酸化細胞凋亡敏感性基因 規(guī)格: 0.1ml NDUFA10 NADH氧化還原酶輔酶10抗體 規(guī)格: 0.2ml CENPA 著絲粒蛋白A 規(guī)格: 0.1mlFactor H 補體因子H抗體 規(guī)格: 0.2ml VANGL2 神經(jīng)管畸形相關蛋白VANGL2抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-GRM2/GLUR2(Tyr876) 磷酸化促代謝型谷氨酸受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml phospho-CTNNBIP1 (Ser36) 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlCKMT2 肌酸磷酸激酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml GCMA/GCM1 絨毛膜特異性轉錄因子GCMa抗體 規(guī)格: 0.2mlConnexin-32 間隙連接蛋白32抗體 規(guī)格: 0.1ml APOA4 載脂蛋白A4抗體 規(guī)格: 0.2mlRRAGA RAS相關GTP結合蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml SLAMF9/CD2F-10 CD2F-10抗體 規(guī)格: 0.2mlBAALC 腦和急性白病胞漿蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Neurogenin 2/NGN2 神經(jīng)元素2抗體 規(guī)格: 0.1mlCTAGE4 皮膚T細胞淋巴瘤相關抗原4抗體 規(guī)格: 0.2ml FIS1/TTC11 線粒體裂變1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCD11b/Integrin αM/Integrin Alpha M 整合素αM/巨噬細胞表面分子抗體 規(guī)格: 0.1ml T7 tag T7 tag標簽抗體 規(guī)格: 0.1mlCIP2A/p90 Autoantigen 蛋酸酶PP2A抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml CXXC5 二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SRC-3 (Thr24) 磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3 規(guī)格: 0.1ml |