產(chǎn)品特點(diǎn): 1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 本公司代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息,請(qǐng)咨詢?cè)诰€客服。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)規(guī)格 | CoC1/DDP (human ovarian resistant cell sublines) | 5×106cells |
? 細(xì)胞培養(yǎng)技巧: 一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng): 1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 % 2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。 凍存的步驟: 1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情形。 2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。 3. 依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。 4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻, 分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。 5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中,再放入液氮槽中。程序?yàn)? program 7: HB CELL 。 培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 羥基吳茱萸堿 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 ADRα1A ELISA Kit 腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)ELISA試劑盒 拓?fù)淇?/font> 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 7號(hào)染色體開放閱讀框63抗體 TE ELISA Kit 端粒酶(TE)ELISA試劑盒 朝藿定B 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 人抗存活素抗體(Anti-Survivin antibody)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/mL小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒,英文名:VD2 ELISA Kit 基橙皮甙 質(zhì)量規(guī)格:≥95% Methyl hesperidin 球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisRL95-2, 人內(nèi)膜腺細(xì)胞系 2,6-二基-4-(2-基)-3 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 50mg DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體 SCLY ELISA Kit 硒代半胱氨裂解酶(SCLY)ELISA試劑盒 地蒽酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 ANTHRALIN 中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii亮白曲霉 Aspergillus candidus 雜質(zhì)Ⅰ 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 50mg 豬胰島素單克隆抗體 SNUPN1 ELISA Kit Snurportin1蛋白(SNUPN1)ELISA試劑盒 長(zhǎng)春西?。?biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 Vinpocetine 屎腸球菌 Enterococcus faecium塔賓曲霉 Aspergillus tubingensis L-天門冬氨;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g 肉堿氧位基轉(zhuǎn)移酶抗體 MUC21 ELISA Kit 粘蛋白21(MUC21)ELISA試劑盒 AC-DC亞酰胺單體 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Ac-dC Phosphoramidite 人原位胰腺腺細(xì)胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 阿莫西林克拉維系統(tǒng)適用性對(duì)照品 英文名稱:Amoxicillin clavulanic acid system suitability control products 保存:-20℃ 規(guī)格:30mg 錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體 阿魏松柏酯 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 膜粘連蛋白9抗體 FE ELISA Kit 鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 科博肽 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 5mg/支 E1A激活基因刺激蛋白2抗體 MINA ELISA Kit MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)ELISA試劑盒 CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)規(guī)格Phospho-BLNK(Tyr96) 磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlLaminin B2 gamma 1 層粘連蛋白B2γ1抗體 規(guī)格: 0.1ml Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格: 0.1mlNanog 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Persephin PSP抗體 規(guī)格: 0.1mlMMP-7 基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體 規(guī)格: 0.1ml EPCR/CD201 內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-EGFR (Tyr1092) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlBCMA/CD269 B淋巴細(xì)胞成熟因子抗體 規(guī)格: 0.1ml SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 規(guī)格: 0.1mlVillin 絨毛蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Phospho-CHK2 (ser516) 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 規(guī)格: 0.1mlTFAR19/PDCD5 凋亡相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlFactor VIII 第八因子抗體 0.1ml Donkey anti-human IgG whole serum 驢抗人IgG抗清 規(guī)格: 1mlCBFA1/RUNX2 核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1 規(guī)格: 0.1ml phospho-PRKCB(Ser642) 磷酸化蛋白激酶C抗體 規(guī)格: 0.1mlANKS6 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格: 0.1ml HLC3/Kanadaptin 肺基因蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHGC3/PCDH2 原鈣粘蛋白γC3抗體 規(guī)格: 0.2ml BTG1 B細(xì)胞遷移基因1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-IRAK4(Thr345) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體 規(guī)格: 0.1ml IL-6 白介素6 規(guī)格: 0.1mlRNF150 環(huán)指蛋白150抗體 規(guī)格: 0.2ml |