凍存的步驟：
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻，置于室溫下待用。
3. 依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作，收集培養(yǎng)好的細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4. 離心，去除上清液，加入適量冷凍保存溶液，使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml，混合均勻，
分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中，1 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16～18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中，再放入液氮槽中。程序?yàn)? program 7: HB CELL 。

本公司代理ATCC細(xì)胞，提供售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息，請(qǐng)咨詢?cè)诰€客服。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
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細(xì)胞培養(yǎng)技巧：
一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng)：
1. 在冷凍保存之前，應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高，凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 ％
2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì)，例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以5~10 ml 小體積分裝，4 度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。
4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度：
4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，細(xì)胞濃度不要太高，某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。
4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6，依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 ％ DMSO，若是不確定細(xì)胞之冷凍條件，在做冷凍保存之同時(shí)，亦應(yīng)作一個(gè)backup culture，以防止冷凍失敗。 
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

多明 訂購|咨詢 規(guī)格： 100mg 化鐵蛋白Fe65抗體 FN ELISA Kit 纖維連接蛋白(FN)ELISA試劑盒

核糖核(酵母) 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR RNA 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae香菇 Lentinula edodes

歐夾竹桃苷 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%；5mg/支 FAM63A蛋白抗體 CHD3 ELISA Kit 染色質(zhì)域解旋酶DNA結(jié)合蛋白3(CHD3)ELISA試劑盒

二十八(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 1-Octacosanol 白介素11(IL11)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interleukin 11 (IL11)

維生素A 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥99%;20mg 人交叉的同族體4(ROBO4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠CD80分子(CD80/B7-1)ELISA試劑盒，英文名：CD80/B7-1 ELISA Kit

鹽四環(huán)素溶液,50 mg/ml 質(zhì)量規(guī)格：50 mg/ml,滅菌裝 Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterile 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGFB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB)

硬脂(50%) 質(zhì)量規(guī)格：含量50%，藥用級(jí) Stearic acid 酒假絲酵母 Candida kefyrCT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)

蒲公英萜酯  英文名稱：Taraxerol acetate   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98%10mg/支 鈉離子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗體

特定 訂購|咨詢 規(guī)格： 50mg ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 17小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒，英文名：IL-9 ELISA Kit

天青II曙紅 質(zhì)量規(guī)格：BS Azure II eosinate 人呼吸道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

丹參素 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial ELISA Kit for Vitamin D3大鼠巢蛋白2(NID2)ELISA試劑盒，英文名：NID2 ELISA Kit

 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體 Lp-α ELISA Kit 脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒

桿菌肽鋅 標(biāo)準(zhǔn)品 訂購|咨詢 規(guī)格： 60mg 人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒，英文名：vaspin ELISA Kit

大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Rabbit Anti-Avidin/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1mlMAdCAM1  粘膜細(xì)胞粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCK2  磷酸羧化酶2抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-PRKD3(Ser41)  磷酸化蛋白激酶C nu型抗體 規(guī)格: 0.1mlEphA8/Eph receptor A8  酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體 規(guī)格: 0.2ml

VDAC3  線粒體外膜孔蛋白3抗體（電壓依賴陰離子通道蛋白3） 規(guī)格: 0.2mlDISC1 (CT)  DISC1 C端抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Bcl-2(Thr129)  磷酸化Bcl-2抗體 規(guī)格: 0.1ml

CRELD2  富含半胱氨酸與表皮生因子樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

C6orf58  6號(hào)染色體開放閱讀框58抗體 規(guī)格: 0.2ml

STAT1  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 規(guī)格: 0.1ml

NeuroD1/NEUROD  神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CHCHD6  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLF5/UKHC  驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5B抗體 規(guī)格: 0.1ml

SDF4  基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4抗體（鈣結(jié)合蛋白） 規(guī)格: 0.2ml

MID2/RNF60/Midline-2  環(huán)指蛋白60抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM  兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 1mg