ELISA動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)目，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動物反應(yīng)良好，而且能夠提供足足數(shù)目的血清，用于免疫的動物應(yīng)適齡，健壯，無感染性疾患，為雄性，此外還需十分留意動物的飼養(yǎng)，以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。在無菌前提，吸出血清，分裝（0.05～0.2ml），貯于-40℃以下冰箱，或凍干后貯存于4。取動脈或靜脈放血時，將兔放入一個特造的木匣或籠內(nèi)，耳露于箱（籠）外，也可由另一人抓住兔身。為避免損失抗原，亦可用一打針器裝抗原液，另一打針器裝佐劑，二者以聚乙烯塑料管連接，然后二者往返反復(fù)抽吸，約數(shù)十分鐘后即能*乳化。交叉反應(yīng)率一般是用競爭按捺曲線來判定的。若用兔，用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2～3kg為宜。
家兔是zui常用以產(chǎn)生抗體的動物，因此這里主要討論兔血的收集。通常，特異性是以交叉反應(yīng)率來表示的。頸動脈放血時，將兔仰臥，固定于兔臺，剪去頸部的毛，切開皮膚，暴露頸動脈，插管，放血。以不同濃度的抗原和近似抗原物質(zhì)分別做競爭按捺曲線，計算各自的結(jié)合率（B/T或B/B0），求出各安閑IC50時的濃度，按下列公式計算交叉反應(yīng)率。二禮拜后，可在另一耳放血。此法可反復(fù)多次放血。