ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒酶標(biāo)記抗體方法主要有兩種:戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法。
1、戊二醛交聯(lián)法
戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑,它可以使酶與蛋白質(zhì)的氨基通過它而聯(lián)接。堿性磷酸一般用此法進(jìn)行標(biāo)記。交聯(lián)方法分一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中,反應(yīng)后既得酶標(biāo)記抗體。
ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡便、有效(結(jié)合率達(dá)60%~70%)和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是交聯(lián)反應(yīng)是隨機(jī)的,酶與抗體交聯(lián)時(shí)分子間的比例不嚴(yán)格,結(jié)合物的大小也不均一,酶與酶,抗體與抗體之間也有可能交聯(lián),影響效果。在兩步法中,先將酶與戊二醛作用,透析除去多余的戊二醛后,再與抗體作用而形成酶標(biāo)抗體。也可先將抗體與戊二醛作用,再與酶聯(lián)結(jié)。
2、過碘酸鹽氧化法
ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒本法只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標(biāo)記常用此法。反應(yīng)時(shí),過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑,可與蛋白質(zhì)上的氨基形成Schiff氏堿而結(jié)合。
TRIM50 TRIM50蛋白抗體
RNF88 環(huán)指蛋白88抗體
TRIAD3 鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體
RNF98 環(huán)指蛋白98抗體
RNF16 環(huán)指蛋白16抗體
RNF105 環(huán)指蛋白105抗體
RNF125 環(huán)指蛋白125抗體
Thrombin heavy chain 凝血酶(凝血因子II)重鏈抗體
TGF Beta R3 轉(zhuǎn)移生長因子β受體3抗體(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)
TRPV1 辣椒素受體抗體
TNFAIP1 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體
Thymosin Alpha-1 胸腺肽α1抗體
TIMP-4 金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體
TIMP-1(NT) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端)
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