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ELISA試劑盒抗體反應(yīng)使抗原固相化及原理
點(diǎn)擊次數(shù):355 更新時間:2016-09-06

ELISA試劑盒的基本原理有三條:
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,ELISA試劑盒而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;
(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,ELISA試劑盒根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。
   因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附性能。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過抗原。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
CAMSAP1    鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體
Claudin 1    緊密連接蛋白1抗體
C1orf149    1號染色體開放閱讀框149抗體
phospho-c-Kit(Tyr823)    磷酸化原癌基因c-kit抗體
phospho-c-Kit(Tyr568 + Tyr570)    磷酸化原癌基因c-kit抗體
phospho-C-REL (Ser503)    磷酸化淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集素抗體
C2orf39    2號染色體開放閱讀框39抗體
C2orf49    2號染色體開放閱讀框49抗體
C2orf50    2號染色體開放閱讀框50抗體
ERCC8    科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA抗體
phospho-Cytokeratin 8 (Ser73)    磷酸化細(xì)胞角蛋白8抗體
phospho-Cytokeratin 8 (Ser431)    磷酸化細(xì)胞角蛋白8抗體
phospho-CK18(Ser52)    磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體
Cytohesin 2    胞粘蛋白2抗體
Cytochrome P450 2A6    細(xì)胞色素CPA6抗體
CYP3A1    細(xì)胞色素CYP3A抗體
ELISA試劑盒

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