一、目的要求ELISA試劑盒
1、掌握血液樣品前處理方法
2、掌握回收率測定方法和計算方法、
二、主要儀器和藥品。
液相色譜儀,ODS分析柱,水楊酸標準品,空白血漿,標準血樣。
三、實驗方法
水楊酸(Salicylic Acid)
水楊酸69-72-7
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(150mm x 4.6mm,5um)流動相:甲醇-(10mmol/L,ph3.0)(5:5):流速1ml/min:檢測波長230nm:進樣體積20uL.理論板數(shù)以水楊酸峰計不低于2000.
血漿中水楊酸回收率測定:取水楊酸標準品適量,加甲醇溶解并稀釋成0.5mg/mL的對照品溶液,取適量用流動相稀釋成20ug/ml的標準品的稀釋液。另取空白血漿0.4ml,加入25ul水楊酸對照品溶液,漩渦混勻,加入0.2ml6%高氯酸沉淀蛋白,10000r/min離心10min,取上清液作為樣品測定液。同法制備血漿空白液,取對照品稀溶液,樣品測定液和需將空白頁各20ul、進行,記錄色譜圖。
回收率計算:根據(jù)對照品稀溶液濃度,峰面積和樣品測定液峰面積,水楊酸加入量,計算回收率。對照品稀溶液濃度C對=20ug/ml,樣品測定液中加入的水楊酸濃度Cm=(0.023 x 500)/(0.4+0.2+0.025)=20ug/ml,所以血漿中水楊酸回收=A樣/A對 x 100%
四、注意事項
1、標準品溶液與樣品液必須分別重復(fù)進行三次,取平均峰面積進行計算。
2、外標法測定含量,樣品處理中應(yīng)嚴格定量操作。
3、為獲得高的精密度,驚醒量必須大于定量環(huán)容積的2-3倍
phospho-CD32B 磷酸化CD32B抗體
Complement C3 過敏毒素C3抗體
CD66c 癌胚抗原抗體相關(guān)細胞粘附分子抗體
CPEB1 細胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體
CST7 半胱氨酸蛋白酶抑制劑7抗體
C22orf29 22號染色體開放閱讀框29抗體
Contactin-1 神經(jīng)細胞表面蛋白F3
Cathepsin C/DPP1 組織蛋白酶C抗體
Caspase 4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體
caspase-3 p12 subunit 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體
C7ORF61 7號染色體開放閱讀框61抗體
Claudin 11 少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗體