ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測(cè)定的需低溫冰存。可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份,ELISA試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA試劑盒各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELISA試劑盒,國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,嚴(yán)格遵照劃定操縱,必能得出正確的結(jié)果。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測(cè)定需用稀的血清,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
AKAP12 絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白α抗體
APG4B 自噬相關(guān)蛋白4B抗體
ADAMTS12 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體
alpha Actinin 4-Loading Control α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體
Alkaline Phosphatase 堿性磷酸酶抗體
AU1 tag AU1 tag標(biāo)簽抗體
AEBP1 脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
AKT1 蛋白激酶B
AKT1 蛋白激酶B
ANGL2 血管生成素樣蛋白2抗體
Angiopoietin 4 血管生成素3/血管生成素4抗體
Annexin I 膜粘連蛋白 I抗體
Annexin A2 膜粘連蛋白 Ⅱ抗體