人類干細胞通常是在一層飼養(yǎng)細胞上培養(yǎng)的,據(jù)認為,這可為細胞提供必需的營養(yǎng)物質(zhì),并有助于防止細胞分化。zui近,一項新的研究對這種根深蒂固的做法提出了挑戰(zhàn)。
*,干細胞是很難維持和培養(yǎng)。像所有的真核細胞一樣,它們對養(yǎng)分的有效性、pH值、溫度、氧氣和二氧化碳的含量都很敏感,而且它們也易于分化,留給研究人員的細胞不同于他們打算在實驗中使用的細胞。
在早期,研究人員發(fā)現(xiàn),在小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)層的頂部培養(yǎng)干細胞,可阻礙分化并有助于維持干細胞的健康。但是MEF特別不容易維持自我。從那時起,研究人員和生物技術(shù)公司已經(jīng)開發(fā)出其他有效的飼養(yǎng)層細胞系,可提供干細胞培養(yǎng)方面的優(yōu)勢,以及與干細胞之間更有利的相互作用,無飼養(yǎng)細胞的方法也已經(jīng)變得可用。但是,干細胞培養(yǎng)通常仍然需要研究人員成功地維持兩種類型的細胞,并且,無飼養(yǎng)層細胞的方法要求高水平的細胞接種密度、專業(yè)的媒質(zhì)和生長補充劑,從而使得它們非常昂貴。
zui近,一項新研究,對長期持有的觀念——飼養(yǎng)細胞為干細胞生長提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)并防止細胞分化,提出了一些質(zhì)疑。
為了調(diào)查飼養(yǎng)層細胞在干細胞培養(yǎng)中的作用,研究小組根據(jù)標準培養(yǎng)程序需要,制備了人成纖維細胞培養(yǎng)物,但是在添加干細胞之前,他們用戊二醛或甲醛固定成纖維細胞。這會使細胞層的拓撲結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,但會殺死細胞。去除固定劑之后,他們把人類誘導(dǎo)多能干細胞(hiPSC)分層堆放在死亡的飼養(yǎng)層細胞上。
他們發(fā)現(xiàn),hiPSC不僅粘附并生長為健康的培養(yǎng)集落,而且它們也持續(xù)表達多能性標志,從而表明分化也被阻斷。這些細胞也在體內(nèi)形成具有所有三個胚層的畸胎瘤,這是干細胞的一個定義性特征。
由于死亡的飼養(yǎng)層細胞不能給干細胞提供營養(yǎng),因此這些結(jié)果表明,它們在干細胞培養(yǎng)中發(fā)揮的作用,并不像預(yù)期的那么重要。假設(shè),飼養(yǎng)細胞層的拓撲結(jié)構(gòu),可能在兩種細胞類型之間的關(guān)系當中,扮演zui重要的角色。
這讓我覺得,我們可以用一種納米方法來培養(yǎng)干細胞。我們可以用3D打印技術(shù),模仿飼養(yǎng)層細胞的微毫米拓撲(nanotopology),并在未來*不使用飼養(yǎng)細胞。
即使在開發(fā)出模仿飼養(yǎng)層形狀的培養(yǎng)基之前,這些發(fā)現(xiàn)仍然可以降低成本、勞動力,并簡化干細胞培養(yǎng)技術(shù)。因為在這個過程中飼養(yǎng)層細胞不需要保持活力,我們可以將它們儲存在室溫,并花更少的時間培養(yǎng)它們。