一般是對結合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定，然后按下列公式計算：

酶量（mg/ml）=OD403×0.42

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62

對于過碘酸鈉氧化法制備的標記抗體量，按下列公式計算：

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.34）×0.62

已知酶量和IgG量后，即可計算出標記抗體的摩爾（mol）比值。

HRP/IgG摩爾比值=HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4

結合物中酶總量=HRP（mg/ml）×結合物溶液量

結合物產(chǎn)率=結合物中酶總量/標記時加入的酶量×100%

用于ELISA的結合物的酶量為400(g/ml時效果一般，為500(g/ml時效果較好，達 1000(g/ml時效果好。mol.比值由于結合物中含的IgG并不wan全可靠，所以不能作為主要參數(shù)。一般認為mol.比值為0.7時效果一般，1.0時效果較好，1.5-2.0時最好。酶結合率為 7%時效果一般，為9%－10%較好，達30%以上時最好。