簡述ELISA標本的處理
點擊次數(shù):423 更新時間:2022-10-17
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據(jù),為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性,在實驗過程中必須堅持全面的質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制,在收集標本前都必須有一個完整的計劃。ELISA標本的處理:
1、血清:室溫血液私人凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,如有沉淀形成,應(yīng)再次離心3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成分時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清,檢測細胞內(nèi)的成分時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成分。5.組織標本:切割標本后,稱取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?,標本融化后任然保?-8°C的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行試驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20°C保存,單應(yīng)避免反復(fù)凍融。