elisa測定試劑盒使用原理:
elisa測定試劑盒技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應,所以任何的診斷試劑離不開的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結(jié)合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
elisa測定試劑盒組成結(jié)構(gòu):
一、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后,1000*g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心的分離。
二、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
三、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
四、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
五、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
elisa測定試劑盒試劑盒成分:
一、預包被板: 抗小鼠Elisa試劑盒-6兔子IgG,親合純化 96T
二、 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
三、標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
四、 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
五、 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
六、顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
七、終止液: 1N硫酸 12mL x 1
八、濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)