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elisa檢測(cè)試劑盒反應(yīng)步驟與注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):675 更新時(shí)間:2020-12-16

elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

將目標(biāo)抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

 

elisa檢測(cè)試劑盒反應(yīng)步驟:

(1)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。

(2)加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。

(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。 

(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。

(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

(9)應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔,整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。elisa檢測(cè)試劑盒從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):

在收集標(biāo)本前必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成分是否足夠穩(wěn)定,我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,請(qǐng)及時(shí)儲(chǔ)存在4℃的條件下備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本,請(qǐng)?jiān)谠炷H〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以請(qǐng)避免反復(fù)凍融。有代測(cè)需求的客戶,取材前請(qǐng)務(wù)必和我司銷售人員索要說(shuō)明書(shū),具體操作事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員保持溝通。

 

聯(lián)系人:王經(jīng)理
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