大鼠ELISA試劑盒以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。下面來看看大鼠ELISA試劑盒的一些概念。
一、大鼠ELISA試劑盒的準確度
通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對照試驗及干擾試驗的結果來分析判斷:
1.回收試驗 回收率越接近100%,準確率越高,一般以100%±5%為合格。
2.定值血清的測定 對于某些無法準確加入標準物的試劑盒,可用低、中、高濃度的定值血清進行測定,測得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格。
3.對照試驗 將被檢試劑盒與*的參考方法同時測定若干樣本(一般要求100份,zui少需30份),計算兩組結果的相關系數和直線回歸方程。
4.非特異性與干擾試驗 對維生素C、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度,干擾值越小越好。
二、大鼠ELISA試劑盒精密度
試劑的瓶間差異、批內精密度和批間差異三組測定的平均值之間應無顯著差異,否則,試劑盒的均一性不符合要求:
1.瓶間差異:同一試劑盒,取10瓶試劑復溶,測定同一樣品的含量,求平均值、標準差、變異系數。
2.批內精密度:同一樣品用同一瓶試劑測定10次,求平均值、標準差、變異系數
3.批間差異:同一樣品,用不同批號的10瓶試劑測定,求平均值、標準差、變異系數
三、線性范圍
指該試劑盒按其說明使用時可準確測量的范圍。被檢樣品的含量超出測定線性范圍,必須改變樣品與試劑體積的比例,重新測定才能得到準確結果。試劑盒的測定線性范圍是衡量試劑盒質量的一個指標,也是正確使用該試劑盒的關鍵之一。
四、抗干擾作用:雙試劑型試劑盒主要優(yōu)點是抗干擾作用。
五、靈敏度:在終點法靈敏度以特定波長下1cm光徑時單位濃度的吸光度值表示。